Серологическая и иммунологическая диагностика

1) РА (развернутая реакция агглютинации Райта, реакция агглютинации на стекле Хеддльсона) используется только для диагностики острой формы заболевания. Серологическую диагностику проводят с 10 - 12 дня, когда появляются антитела. Наиболее высокий титр антител обнаруживается в стадии бактериемии. Через 2-3 месяца РА отрицательные в 20 % случаев, а через полгода - в 50 - 60 %.

Ориентировочная реакция агглютинации Хеддльсона. Является предварительной пробой обнаружения антител в сыворотке больного. Реакцию ставят на обычном сухом стекле, хорошо обезжиренном и расчерченном на 6 квадратов размером 4 х 4 каждый. В квадраты последовательно наносят
(0,04, 0,02, 0,01 мл) сыворотки больного и контроль 0,02 мл. К первым трем объемам добавляют 0,03 мл неразведенного бруцеллезного единого диагностикума. В контроль сыворотки добавляют 0,03 мл физиологического раствора. Компоненты осторожно размешивают стеклянной палочкой. Последовательность смешивания: от минимальной дозы сыворотки к максимальной. Контроль антигена – один для всех сывороток данного опыта (0,03 антигена + 0,03 физиологического раствора). Стекло прогревают 2 минуты над пламенем горелки до 37ºС. В положительных случаях агглютинация антигена происходит немедленно. За счет подкрашивания диагностикума (антигена) генцианвиолетом или другим анилиновым красителем образуются ясно видимые хлопья агглютината. Максимальный срок наблюдения - 8 минут.

Для диагностики бруцеллеза имеет значение только положительная реакция в 3-х дозах в сочетании с положительной аллергической пробой.

Развернутая РА Райта. Реакцию Райта ставят методом «равных объемов». Результаты считывают через сутки после инкубации при 37°С. Диагностический титр - 1/200.Сыворотку больного и диагностикум разводят физиологическим раствором, в который предварительно добавляют 0,5% раствор фенола (так называемый карболизированный физиологический раствор).

Постановка реакции: сыворотку больного раститровывают по карболизированному физиологическому раствору (0,5 + 0,5 мл) добавляют

бруцеллезный единый диагностикум в разведении 1:10 (0,5 мл).

При титре антител 1:50 - результат «сомнительный», при титре антител 1:100-1:200 - результат «положительный», 1:800 и выше - результат «резко положительный»

2) Кольцевая проба Банга на бруцеллез используется для выявления антител в молоке. В пробирку с молоком вносят убитую культуру бруцелл, окрашенных гематоксилином.

При отсутствии антител молоко гомогенно окрашивается в синий
цвет. При наличии в молоке антител происходит преципитация бактерий и образование (сверху) темно-синего кольца.

3) Неполные антитела выявляют реакцией Кумбса и Винера. Неполные
антитела определяются во все фазы инфекционного процесса, но
наибольшее диагностическое значение реакция Кумбса приобретает при
хроническом бруцеллезе и в отдаленные сроки обследования.

4) Реакция латекс-агглютинации (РАЛ)

5) ИФА

Поиск по сайту: